Question

Изоэлектрическое осаждение объяснить суть метода и зачем его используют. Помогите пожалуйста

Answer 1

Это свойство является основой метода очистки белков путем изоэлектрического осаждения(осаждения в изоэлектрических условиях) pH смеси белков доводится до значения, равного значению р/ искомого белка, так что последний осаждается из смеси. 

Answer 2

Изоэлектрическое осаждение (или изоэлектрическая фокусировка) - это метод разделения и концентрирования белков в электрофорезе на основе их изоэлектрических точек (pI - изоэлектрический pH). Этот метод основан на разделении белков в градиенте pH при приложении электрического поля.

Суть метода:

1. Подготовка геля: Создается градиент pH в геле (обычно это полиакриламидный гель), который плавно меняется от кислой до щелочной стороны.
2. Подготовка образца: Смесь белков разделяется по заряду и приводится к зарядовому состоянию, затем наносится на поверхность геля.
3. Электрофорез: При включении электрического поля заряженные белки начинают двигаться в градиенте pH геля к своим изоэлектрическим точкам (pI).
4. Фокусировка: Когда белки достигают своих изоэлектрических точек, они становятся электрически нейтральными и перестают двигаться. Таким образом, они концентрируются в узких зонах, разделяясь друг от друга.

Зачем используют изоэлектрическое осаждение:

1. Разделение белков: Метод позволяет разделить сложные смеси белков на отдельные компоненты в зависимости от их изоэлектрических точек, что позволяет получить информацию о различных белковых компонентах смеси.
2. Концентрирование белков: Так как белки фокусируются в узких зонах на геле, это позволяет концентрировать их и увеличить их чувствительность для последующего анализа, такого как масс-спектрометрия или иммуноблоттинг.
3. Подготовка образца: Изоэлектрическое осаждение может использоваться для предварительной очистки и концентрирования белковых образцов перед их дальнейшим анализом.

В целом, изоэлектрическое осаждение является мощным методом белковой электрофореза, который широко применяется в биохимических и биомедицинских исследованиях для разделения, концентрирования и анализа белковых образцов.