Question

Объясните последовательность создания векторной конструкции.​

Answer 1

Ответ:

Конструирование клонирующих векторов подразумевает встраивание или удаление удобных для идентификации клонов генетических элементов (специфических сайтов рестрикции, инициации и регуляции транскрипции). Например, при создании плазмидных клонирующих векторов ослабляют систему контроля репликации и добавляют или вырезают гены антибиотикоустойчивости. При формировании фаговой векторной конструкции экзогенную ДНК встраивают в район локализации маркерного гена, позволяющего вести селекцию химерных фагов по экспрессии химерного белка (часть полипептидной цепи соответствует маркерному белку, а часть -информации, заключенной во встроенном фрагменте ДНК). Определение химерного белка возможно при использовании антител к фрагменту маркерного белка или участку, кодируемому чужеродной ДНК, а также путем выявления функционально активного белка после протеолитического расщепления химерного полипептида. При конструировании искусственных дрожжевых хромосом YAC (от англ. yeast artificial chromosomes) используют плазмидные векторы, содержащие в своем составе известные центромерные и теломерные последовательности хромосом дрожжей, необходимые для поддержания репликации векторов в клетках хозяина. Характеристики клонирующих векторов представлены в таблице.

Конструирование вектора. Сама по себе кассета экспрессии не может попасть в клетку-реципиент и интегрироваться (внедриться) в хромосомы растения-хозяина. Для этого нужен вектор — специальная молекула ДНК, которая может проникать в клетки растений и там самореплицироваться, либо встраиваться в ДНК хозяина и реплицироваться вместе с ней.

Любой полноценный в функциональном отношении ген, в том числе и рекомбинантный, состоит из регуляторной и структурной частей. Генетический код, с помощью которого последовательность нуклеотидов в кодирующей структурной части гена определяет последовательность аминокислот в кодируемом этим геном белке, универсален для всех организмов. Это дает принципиальную возможность получения полноценной экспрессии самых разнообразных осмысленных последовательностей нуклеотидов, в том числе и искусственно синтезированных, в любом природном генетическом окружении.

Регуляторная часть генов распознается соответствующими ферментными системами организма и обеспечивает экспрессию его структурной части. Регуляторная часть гена высокоспецифична в отношении природных генетических эффекторов (РНК-полимераз, рибосом, факторов транскрипции и трансляции, белковых факторов сплайсинга, ферментов, осуществляющих посттрансляционные модификации полипептидов, и т.п.), и чаще всего она не может эффективно функционировать в гетерологичном генетическом окружении. При конструировании экспрессирующих векторов необходимо учитывать особенности структуры регуляторной части рекомбинантного гена, исходя из того, в каких генетических условиях клонированный ген предполагается экспрессировать.

Объяснение:

Answer 2

Создание векторной конструкции включает несколько шагов, которые следует выполнить последовательно:

1. Определение цели и требований: Сначала необходимо определить, для чего будет использоваться векторная конструкция и какие требования она должна удовлетворять. Например, это может быть создание логотипа, дизайна для печати или иллюстрации для веб-сайта.

2. Исследование и сбор информации: Затем следует провести исследование и собрать необходимую информацию для создания векторной конструкции. Это может включать изучение аналогичных проектов, анализ трендов в дизайне, изучение целевой аудитории и т.д.

3. Создание эскизов: После сбора информации можно приступить к созданию эскизов вручную или с использованием графического планшета. Эскизы позволяют визуализировать идеи и экспериментировать с различными композициями, формами и цветами.

4. Создание контуров: Когда эскизы готовы, следующий шаг - создание контуров векторной конструкции. Это можно сделать с помощью специального векторного графического редактора, такого как Adobe Illustrator или CorelDRAW. Контуры создаются при помощи инструментов, таких как кривые Безье, линии, окружности и прямоугольники.

5. Заполнение цветом и добавление деталей: После создания контуров можно приступить к заполнению цветом и добавлению деталей. В векторных редакторах можно выбирать цвета из палитры или создавать собственные оттенки. Детали могут включать тени, текстуры, градиенты и другие эффекты.

6. Редактирование и корректировка: После завершения векторной конструкции рекомендуется провести редактирование и корректировку. Это может включать изменение размеров, устранение ошибок, улучшение композиции и другие доработки.

7. Экспорт и сохранение: В завершении процесса следует экспортировать векторную конструкцию в нужном формате, таком как AI, EPS, SVG или PDF. Также важно сохранить оригинальный файл векторной конструкции в формате, который позволяет редактирование, чтобы в будущем можно было внести изменения или создать другие версии.

В целом, последовательность создания векторной конструкции включает определение цели, сбор информации, создание эскизов, создание контуров, заполнение цветом и добавление деталей, редактирование и корректировку, а также экспорт и сохранение.