Question

Опишите принципы полимеразно – цепной реакции.​

Answer 1

Объяснение:

Здравствуй, Danialkenzebaj43!

Полимеразно-цепная реакция происходит в 3 этапа:

1)Денатурация

Двухцепочечную ДНК-матрицу нагревают до ~100 градусов на 1 минуту, чтобы цепи ДНК разошлись. Этот этап называется денатурация, так как рушатся водородные связи между цепями ДНК.

2)Отжиг

После денатурации температуру понижают, чтобы праймеры ( участки цепи днк ) могли связаться с матрицей. Температуру понижают обычно до ~70 градусов ( либо на 5 градусов меньше температуры плавления ) . Время, затрачиваемое на этап отжига - 30 сек.

3)Элонгация

ДНК-полимераза реплицирует матричную цепь, "заряжаясь" праймером. Полимераза начинает синтез второй цепи от 3'-конца праймера, связавшегося с матрицей, и движется вдоль матрицы, синтезируя новую цепь в направлении от 5'- к 3'-концу. Температура элонгации зависит от полимеразы.  Эта стадия длится 7—10 мин.

Answer 2

Полимеразно-цепная реакция (ПЦР) - это мощный метод амплификации (умножения) ДНК в лабораторных условиях. Этот метод был разработан в 1983 году Кари Муллисом и стал одним из самых важных инструментов в молекулярной биологии, генетике, медицине и других областях.

Принципы ПЦР:

1. Денатурация: В начале цикла реакции образец ДНК нагревается на высокую температуру (обычно около 94-98°C). Это приводит к разделению двух спиральных цепей двойной спирали ДНК, разрывая водородные связи между комплементарными нуклеотидами. Таким образом, получается две одиночные цепи ДНК.

2. Отжиг (прикрепление праймеров): После денатурации образцу ДНК добавляют короткие одноцепочечные нуклеотидные последовательности, называемые праймерами. Праймеры - это короткие фрагменты ДНК, которые специфически комплементарны участкам ДНК, которые мы хотим амплифицировать. Они служат отправной точкой для синтеза новой цепи ДНК.

3. Экстензия (полимеразная реакция): После прикрепления праймеров к начальным участкам ДНК, добавляется ДНК-полимераза, специальный фермент, который способен синтезировать новую цепь ДНК, используя матрицу-образец и вставляя комплементарные нуклеотиды. Это процесс продолжается до тех пор, пока полимераза не достигнет конца матрицы.

4. Циклы повторения: Циклы денатурации, отжига и экстензии повторяются несколько раз (обычно 20-40 циклов), что приводит к экспоненциальному увеличению количества ДНК-фрагментов с желаемой последовательностью.

В результате этих циклов амплифицируется конкретный фрагмент ДНК, который мог быть присутствующим в исходной образце. Этот метод позволяет из небольшого количества ДНК создать большое количество копий, что делает его незаменимым инструментом для диагностики генетических заболеваний, идентификации ДНК следов на местах преступлений, изучения геномов организмов и многих других приложений.