Question

Почему в качестве фермента цепной реакции используют бактериальную термофильную ДНК- полимеразу?​

Answer 1

Ответ:

ДНК-полимераза может исключить неправильный нуклеотид из цепочки и затем вставить на его место правильный, после чего репликация продолжается в нормальном режиме.

Answer 2

Бактериальная термофильная ДНК-полимераза, такая как полимераза Thermus aquaticus (Taq полимераза), часто используется в полимеразной цепной реакции (ПЦР) из-за своих уникальных свойств, которые делают ее идеальной для данного процесса. Вот несколько причин:

1. Термостабильность: Термофильные ДНК-полимеразы, такие как Taq полимераза, происходят из организмов, обитающих в экстремальных условиях, например, в горячих источниках. Это означает, что эти полимеразы способны сохранять активность при высоких температурах, которые используются в различных этапах ПЦР (денатурация, отжиг и продление).

2. Устойчивость к термическим шокам: В процессе ПЦР температура циклически изменяется, и бактериальные термофильные полимеразы лучше справляются с такими быстрыми термическими изменениями, чем обычные полимеразы.

3. Продолжительное продление: Бактериальные термофильные полимеразы способны эффективно продолжать синтезировать ДНК-цепь на шаблоне ДНК даже при повышенных температурах, что существенно ускоряет процесс ПЦР.

4. Отсутствие эндонуклеазной активности: Многие бактериальные термофильные полимеразы обладают низкой эндонуклеазной активностью, что уменьшает вероятность разрушения ДНК в ходе ПЦР.

5. Чистота продукта: Так как бактериальные термофильные полимеразы имеют низкую активность 5'-3' экзонуклеаз, вероятность удаления нуклеотидов из новообразованной цепи на этом этапе минимизируется, обеспечивая чистоту продукта.

Из-за этих свойств бактериальные термофильные ДНК-полимеразы стали стандартным выбором для многих ПЦР-протоколов, их использование существенно способствует эффективному и надежному усилению ДНК в процессе ПЦР.