Question

Способ получения днк из масла подсолнечника? ​

Answer 1

Способ получения растения подсолнечника, включающий инсерцию фрагмента ДНК, отличающийся тем, что в качестве фрагмента ДНК для инсерции выбирают фрагмент ДНК, транскрибируемая часть которого имеет транскрипт, комплементарный эндогенной мРНК, кодирующей стеароил-АПБ-десатуразу в растении подсолнечника, в результате чего стеароил-АПБ-десатуразная активность снижается у указанного растения подсолнечника относительно стеароил-АПБ-десатуразной активности у подсолнечника дикого типа, и получают трансгенное растение подсолнечника с семенами, содержащими стеарат в количестве от 10 до 40% от общего содержания в них жирных кислот.

Answer 2

Извлечение ДНК из масла подсолнечника может быть сложной задачей, так как масло содержит большое количество липидов, которые могут затруднить процесс. Однако существуют методы, которые позволяют извлечь ДНК из этого типа образца. Ниже приведен общий метод для извлечения ДНК из масла подсолнечника:

1. Материалы и реагенты:

   • Масло подсолнечника
   • Спирт
   • Солевой буфер (содержащий соль и др. реагенты)
   • Протеаза (фермент для разрушения белков)
   • Фенол/хлороформ/изоамиловый спирт (PCI, для извлечения ДНК)
   • Этанол
   • Центрифуга
   • Трубки для центрифугирования
   • Пипетки и микропипетки
   • Лабораторные приборы (микроцентрифуга, термостат и др.)

2. Подготовка образца:

   • Взять небольшое количество масла подсолнечника.
   • Добавить солевой буфер и протеазу, чтобы разрушить клеточные мембраны и белки, содержащиеся в масле.
   • Встряхнуть образец и инкубировать его при определенной температуре и времени для разрушения клеточных компонентов.

3. Извлечение ДНК:

   • Добавить эквивалентное количество PCI (фенол/хлороформ/изоамиловый спирт) к образцу.
   • Тщательно перемешать образец и PCI.
   • Центрифугировать смесь для разделения фаз. ДНК будет находиться в верхней абсолютно прозрачной фазе.

4. Очистка ДНК:

   • Осторожно перенести верхнюю фазу (содержащую ДНК) в новую трубку.
   • Добавить 2-3 объема этилового спирта, чтобы осадить ДНК.
   • Поставить образец в морозильник для осаждения ДНК.

5. Сбор ДНК:

   • Осадить ДНК, центрифугировав при низкой скорости.
   • Осторожно удалите верхний слой спирта.
   • Остаток ДНК можно промыть 70% спиртом, чтобы удалить остатки соли.

6. Сушка и хранение:

   • Высушите ДНК на открытом воздухе или при комнатной температуре.
   • Храните ДНК при -20°C или ниже.

Этот метод может быть сложным и требует лабораторной аппаратуры и химических реагентов, поэтому его следует выполнять только в соответствии с безопасными лабораторными практиками.