Question

для изучения митохондриального днк ученому необходимо достать митохондрию из животной клетке путём цинтрифугирования .На чем основан этот метод?После каких структур можно будет выделить митохондриальную фракцию ?

Answer 1

Данный метод основан на выделении компонентов из разных структур клетки, так как разные органоиды будут осаждаться с разной скоростью вследствие их различной массы. Митохондриальную фракцию возможно выделить после фракции ядра.

Answer 2

Метод центрифугирования основан на разделении смесей на основе различий в их плотности. При этом смесь помещается в пробирку и подвергается вращению с высокой скоростью. Благодаря центробежной силе, более тяжелые компоненты смеси отделяются от менее тяжелых и перемещаются к дну пробирки.

Для выделения митохондриальной фракции необходимо сначала разорвать клеточные мембраны, чтобы освободить митохондрии. Обычно для этого используется гомогенизация тканей в буферном растворе. Затем полученная гомогенат подвергается нескольким этапам центрифугирования при различных скоростях, чтобы отделить различные компоненты клетки.

Первый этап центрифугирования, называемый предварительным центрифугированием, позволяет отделить ядра клеток от цитоплазмы и других клеточных органелл. Затем следует более длительное центрифугирование, которое разделяет митохондрии от других мелких клеточных компонентов, таких как лизосомы и пероксисомы.

Митохондрии собираются в осадок на дне пробирки, который можно затем собрать и использовать для изучения митохондриальной ДНК.